分光光度计的使用方法步骤图解（分光光度计的使用方法）

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1、【实验操作】检查721A型分光光度计的旋钮和开关，使其回复零点。

2、按要求接通电源，按下“T键”，打开暗盒盖和电源开关，指示灯亮。

3、预热20分钟。

4、调节波长旋钮至所需波长。

5、取比色皿分别盛装B、S、U液，置入检测室（比色皿先用蒸馏水洗后，再用比色液润洗才能装比色液）。

6、B液对准光路。

7、调节面板“零位细调”，使指示为00.0，即透射比“T”的零点，同时“一”号闪跃。

8、合下检测室盖.调节“光量粗、细调”电位器，使指示为100.0，须反复6两点操作达到稳定。

9、按下“A”键，指示为“.000”同时“一”闪跃，如果指示读数不是比值时，应调节“消光调零“电位器，使其达到要求。

10、拉出或推入拉杆，使U、S液分别置于光路读取A值，然后移动拉杆，读B管A值，如为0，则前述A值有效。

11、在稳定时，重复读数一次，并按下“T”键。

12、打开检测室盖，取出比色皿，倾去比色液于水槽中，用自来水冲洗干净，倒置于表面皿（铺有滤纸）中。

13、1关上电源开关，拔出电源插头，取出比色皿架，检查检测室内是否有液体溅出，并擦净。

14、检测室内放入硅胶袋，合上盖，套上仪器罩。

15、【计算】利用标准管计算测定物含量 实际测定过程中，用一已知浓度的测定物按测定管同样处理显色，读取吸光度，再根据（6）式计算，即A1= K1C1l1 A2= K2C2l2式中AA2分别为已知浓度标准和未知浓度测定吸光度。

16、cc2分别为已知浓度标准管和未知浓度测定管中测定物浓度。

17、因盛标准液和测定液的比色杯径长相同（l1=l2），故上二式可写成：A1/K1C1= A2/K2C2……………………………………………(7)因标准液和测定液中溶质为同一物，K值相同，即：（7）式可换算成下式：C2=（A2/A1）× C1 …………………………………………(8)因测定液和标准液在处理过程中体积相同，故（8）式可写成：m2 =（A2/A­1）וm1…………………………………………(9)式中mm2分别表示标准液和测定液中待测物的含量。

18、（9）式为实验操作中常用计算式。

19、【注意事项】仪器须安放在稳固的工作台上，不能随意搬动。

20、严防震动，潮湿和强光直射。

21、盛装比色液时，约达比色皿2/3体积，不宜过多或过少。

22、若不慎使溶液流至比色皿外面须用棉花或拭镜纸擦干，才能放入比色架。

23、拉比色杆时要轻，以防溶液溅出，腐蚀机械。

24、千万不可用手或滤纸等物摩擦比色皿的透光面。

25、比色皿用后应立即用自来水冲洗干净，若不能洗净，用5%中性皂溶液或洗衣粉溶液浸泡，也可用新鲜配制的重铬酸钾洗液短时间浸泡，然后用水冲洗干净，倒置晾干。

26、每套分光光度计上的比色皿和比色皿架不得随意更换。

27、试管或试剂不得放置于仪器上，以防试剂溅出腐蚀机壳。

28、如果试剂溅在仪器上，应立即用棉花或纱布擦干。

29、测定溶液浓度的光密度值宜在0.1—0.7之间最符合光吸收定律，线性好，读数误差较小。

30、如光密度超过0.1—0范围，可调节比色液浓度，适当稀释或加浓，再进行比色。

31、合上检测室盖连续工作的时间不宜过长，以防光电管疲乏。

32、每次读完比色架内的一组读数后，立即打开检测室盖。

33、仪器连续使用不应超过2小时，必要时间歇半小时再用。

34、1测定未知液时，先作该溶液的吸收光谱曲线，再选择最大吸收峰的波长作为测定波长。

35、1721分光光度计的放大器暗盒及单色器箱处放有两个硅胶筒，检测室内放硅胶袋，应经常检查，发现硅胶变色，应更换新硅胶或烘干再用。

36、1仪器较长时间不使用，应定期通电、预热。

37、1仪器用完之后，须拔去电源，套上仪器罩。

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