日期:2022-09-28 16:21:42人气:20
1,含二硫键蛋白加1-2mMDTT。DTT是一种硫醇还原剂,当其浓度达到50mM时可促进大多数蛋白的半胱氨酸残基被还原。一般1-2mM起到保护蛋白-SH的作用,10mM以上就可以破坏已经形成的二硫键。还原剂可以使蛋白质的二硫键打开,比如2-巯基乙醇(beta-ME)、二硫苏糖醇(DTT),二硫键是2个-SH基被氧化而形成的-S-S-形式的硫原子间的键。功能二硫键与蛋白质高级结构的生物活性有关,同时与蛋白质的复性也有关联。如核糖核酸酶A经巯基乙醇(还原剂)和尿素(蛋白质变性剂)处理后,发生变性作用,4对二硫键断裂,多肽链伸展开来,高级结构发生变化,失去生物活性。如果用透析法将大量还原剂和变性剂除去,在微量还原剂存在下,4对二硫键在原来的位置重新形成,伸展开的多肽肽链会自发折叠成天然构象,生物活性得到恢复。此试验也证明蛋白质高级结构的信息存在于一级结构中。以上内容参考:百度百科-二硫键
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